Diabetologia：激活但动态受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次不止现呼吸道自身免疫到不止现1同型高血压临床呕吐的令人满意数万人在儿童时期就有很好的描述，多个呼吸道自身免疫阳性的儿童之中有70%在胰岛素转换后10年内入院高血压，而随访15年的儿童这一比例减小到84%。相比较之下，占临床1同型高血压一半以上的同型1同型高血压的复发前提还从未赢取确实的学术研究。

越来越多的人开始适用仍须系统来定义1同型高血压的令人满意：个体在不止现多种呼吸道自身免疫时进入第1阶段性，不止现血糖异常时进入第2阶段性，不止现呕吐时进入第3阶段性。一些多发呼吸道自身免疫阳性的个体，在1期和2期，令人满意较很慢，并发展为复发的1同型高血压。我们先前描述了一组成员在首次检测到多种呼吸道自身免疫样本后有数10年无高血压的极很慢令人满意者，这组成员病患者次数少，但特点非常明确。随后，我们发掘出呼吸道自身免疫特异性CD8+T细胞膜反应在令人满意很很慢的病患者之中原则上不普遍存在，但在近期复发和长期普遍存在的高血压病患者之中很容易检测到。这可能表明，与令人满意病患者相比较，这些病患者化脓性反应的调节增强。

中期学术研究表明，尽管调节性T细胞膜(Treg)数量再次出现异常，但高血压病患者普遍存在一些特性缺陷，其之中仅限于对IL-2的反应能力减小。此外，高血压病患者之中的畸变CD4+T细胞膜可能对调节极富抵抗性，发挥为畸变T细胞膜的抑制作用西移动，连续性转化成的Treg和体外转化成的诱导Treg，以及免疫经历的CD4+T细胞膜之中IL-2反应西移动。本学术研究的目标是描述了CD4+调节性T细胞膜(Treg)在在在极很很慢令人满意者之中的特点，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

步骤：BOX学术研究是一项以年轻人为基础的横向学术研究，在21岁以下确诊的病患者亲属之中检查1同型高血压的危险环境因素。我们先前描述了长期很很慢令人满意者的特点，他们保持多重呼吸道自身免疫阳性超过10年，但从未不止现高血压的临床呕吐，很慢性或非进行时性化脓性。随后，10名继续保持无高血压并愿意提供大量血液样本的很很慢令人满意者扩展到T和B细胞膜特性数据分析。在目前的学术研究之中，8名很慢令人满意者(SP组成员)，之中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的呼吸道自身免疫阳性。所有的参与者都处于1同型高血压令人满意的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身免疫对某些免疫的过敏原，然而，一名病患者仍未处于2期有数6年，但从未不止现临床呕吐，一名病患者被诊断为高血压，该受试者72岁，在采集实验样本时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据数据分析之中对该NAD进行时了实质上审核。受控外周血单个核子细胞膜(PBMCs)，采用多参数流式细胞膜术和T细胞膜抑制作用试验性审核NAD之中Treg的频数万人、表同型和特性。适用FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和复归)进行时无督导聚类数据分析，审核Treg表同型。

结果：与有益NAD相比较，来自很慢令人满意体的清醒CD4+T细胞膜的督导聚类说明了，激来生的清醒CD4+ Treg频数万人减小，与糖皮质激素诱导的TNFR无关细胞(GITR)隐含减小有关。一名HbA1c升高的病患者与令人满意很很慢者和转换的对照组成员相比较，Treg谱有所不同。特性数据得出结论，与有益NAD相比较，来自很很慢令人满意体的Treg介导的CD4+畸变T细胞膜抑制作用显著受损。发挥为对畸变CD4+T细胞膜CD25和CD134隐含的抑制作用减小。

示意图1 险恶的表同型数据分析说明了，CD4+Treg亚同型在很慢令人满意配置文件之中减小。由FlowSOM聚合的Treg会议室，聚集在来自所有NAD的来生CD4+CD45RA -细胞膜上。根据上面物隐含鉴定不止10个元簇:清醒T细胞膜_1;清醒T cell_2;清醒T cell_3;清醒T cell_4;CD49b清醒T细胞膜;HLA-DR + GITR +清醒T细胞膜;缓存Treg_1;缓存Treg_2;缓存Treg_3;和缓存Treg_4。(a)适用9个不同Treg上面聚合的10个元簇的MST。每个终端均是由一个协同(100个协同)，极大的元协同(10个元协同)在终端组成员周围上色。每个终端之中的饼示意图指不止单个上面的隐含级别。(b)每个元聚类的热示意图，以说明了既有上面隐含。(c, d)为HD组成员(c)和SP组成员(d)聚合示意图，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)一般来说总质量为每个metacluster箱两条路线示意图(总质量> 0.05%)确定为HD和SP组成员:缓存Treg_2 (e),缓存Treg_3 (f),缓存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +清醒T细胞膜(h)、清醒T cell_1(i),清醒T cell_2 (j),清醒T cell_3 (k) n d CD49b清醒T细胞膜(l)。红色圆圈均是由**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于示意图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

示意图2 适用CITRUS的预测模同型证实，Treg频数万人的减小是令人满意很很慢的徽章。PG门控(a - f)和柑橘数据分析(g-k)比较SP参与者和转换的HD参与者在CD4+CD45RA−T细胞膜上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会性的均是由性示意图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含进行时受控，模拟FlowSOM社会性。(b) HD(黑点)和SP(星点)组成员以及NADSP 606(红色)之中CD25+ cd127的频数万人简介示意图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的箱两条路线示意图;(c) HLA-DRloGITR−(缓存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(缓存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(缓存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+缓存T cell)。(g - i)柑橘簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含强度着色，箭头突不止的簇被识别为SP和HD配置文件之间的不同。(j)箱两条路线示意图说明了了在SP(星点)和HD(灰点)组成员之中，CITRUS清醒Treg_3和Treg_4的一般来说总质量(比例)。(k)直方示意图说明了每个簇的表同型(粉红色)和Treg上面一般来说隐含与故事情节隐含(白色);上列，缓存Treg_3;下面一行，缓存Treg_4。故事情节与所有其他簇之中上面的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

示意图3 与有益献血者相比较，令人满意很很慢者清醒treg的GITR减小。每个清醒CD4+T细胞膜元簇(清醒T细胞膜_1;清醒T cell_2;清醒T cell_3;CD49b +清醒T细胞膜;HLA-DR + GITR +清醒T细胞膜;缓存Treg_2;缓存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个隐含上面的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)配置文件的隐含热示意图(sp606不仅限于在内)。(c,d)清醒Treg_4元簇之中所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR隐含串联，说明了直方示意图(c)和简介示意图(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(红色)所有NAD仅限于，p< 0.05(白色)NADSP 606和转换的HD不仅限于在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR隐含，从PG门控，从所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(红色)串联，说明了直方示意图(e)和简介示意图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

示意图4 来自很很慢令人满意的CD4+ treg细胞膜压制畸变CD4+T细胞膜的能力减小。SP组成员用白色的两条路线和圆圈指不止，HD组成员用金色的两条路线和圆圈指不止，红色的两条路线/圆圈指不止NADsp606。适用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜进行时分选。CD4+CD25−(转发者)被上面为CFSE, Treg按观察的比例滴定。用抗CD3 /28微珠再造细胞膜，人才3天后进行时流式细胞膜术检测。(a-d)与CD4+转发者一般来说应的treg人才(骨髓)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者人才。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE抑制作用比数万人(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑制作用比数万人。适用阳性对照(激来生的响应细胞膜不含treg)数值抑制作用比数万人。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差数据分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

示意图5 畸变CD4+T细胞膜对很很慢令人满意的T细胞膜再造的抑制作用更尖锐。SP组成员用白色的两条路线和圆圈指不止，HD组成员用金色的两条路线和圆圈指不止，红色的两条路线/圆圈指不止NADsp606。适用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜进行时分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel上面，treg按观察的比例滴定。用抗CD3 /28微珠再造细胞膜，人才3天后进行时流式细胞膜术(CD25反染)和细胞膜因子数据分析。HD Treg与HD、SP或sp606转发者协同人才。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE抑制作用%-(b)。(c,d) CD25抑制作用%-(c)和CD134抑制作用%-(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才之中的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差数据分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

结论：我们得不止结论的结论是，来自很很慢令人满意子的再造清醒CD4+Treg在GITR隐含之中赢取了扩展和非常丰富，强调了进一步学术研究Treg在1同型高血压后果个体之中的互补的必要性。

原文不止处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28